افزایش تولید آنتی بیوتیک کلاولانیک‏اسید با ایجاد گونه های استرپتومایسس کلاولی جروس تراریخت واجد ژن clar

مقدمه : کلاولانیک‏اسید از جمله آنتی بیوتیک های مهار کننده ی β لاکتاماز بوده که توسط استرپتومایسس کلاولی جروس تولید می‏شود. کلاولانیک‏اسید در ترکیب با سایر آنتی بیوتیک های قوی و حساس به β لاکتاماز مورد استفاده بالینی قرار می‏گیرد. ژن calr از جمله ژن هایی بوده که نقش مهمی در تنظیم تولید کلاولانیک‏اسید ایفا نموده و به منظور بیان ژن های اواخر مسیر بیوسنتز کلاولانیک‏اسید مورد نیاز است‏‏.   مواد و روش‏‏ها: کانسترک نوترکیب pmtclar حاوی ژن تنظیمی clar از دانشگاه اصفهان تهیه و به منظور استفاده، از سویه استرپتومایسس لیویدنس با استفاده از روش لیز قلیایی استخراج شد. به منظور انجام ترانسفورماسیون پروتوپلاست از باکتری استرپتومایسس کلاولی جروس تهیه و در مرحله بعد با استفاده از پلی اتیلن گلایکول در سویه استرپتومایسس کلاولی جروس ترانسفورم شد. با استفاده از استخراج پلاسمید و انجام pcr ترانسفورماسیون تأیید شد. در نهایت به منظور بررسی نحوه تأثیر ژن clar اضافه شده از روش بایواسی استفاده شد.   نتایج: کلونی‏ های گچی حاصل از رشد استرپتومایسس کلاولی جروس ترانسفورم شده بر روی محیط gyme حاوی آنتی بیوتیک مشاهده شد که تأیید انجام ترانسفورماسیون است. از سویه ترانسفورم شده پلاسمید استخراج و ساختار آن توسط ژل الکتروفورز تأیید شد. با استفاده از پلاسمید استخراج شده و پرایمرهای اختصاصی clar واکنش pcr انجام و باند 1334 جفت بازی مشاهده شد. در نهایت با انجام روش بایواسی و مشاهده ی هاله عدم رشد در نمونه ترانسفورم شده و مقایسه آن با نمونه کنترل مشخص شد که حضور پلاسمید نوترکیب سبب افزایش 3/3 برابری تولید کلاولانیک‏اسید در سویه استرپتومایسس کلاولی جروس شده است.   بحث و نتیجه‏گیری: در مطالعه حاضر، با انتقال پلاسمید نوترکیب حاوی ژن clar میزان تولید آنتی بیوتیک کلاولانیک‏اسید تا 5/2 برابر افزایش یافت. با توجه به اهمیت دارویی کلاولانیک‏اسید ایجاد سویه هایی که توانایی تولید بیشتر کلاولانیک‏اسید را داشته باشند می توانند به بومی سازی تولید آنتی بیوتیک کلاولانیک‏اسید با صرفه اقتصادی بیشتر درمقیاس صنعتی کمک شایانی نماید.